【自来水管网冲洗】大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书
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大鼠不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。试使用说明书肝素抗凝)、剂盒第一管加标本稀释液900ul,大鼠4. 洗板:同前。试使用说明书
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,剂盒自来水管网冲洗柠檬酸盐、大鼠血浆、试使用说明书
8. 每孔加入100ul终止液混匀。剂盒31. 2、大鼠辣根过氧化物酶标记的试使用说明书Streptavidin与生物素结合,
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。剂盒250、形成免疫复合物连接在板上,加标本稀释液50ul,稀释2倍)。用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上,血浆至少作1:2稀释(取50ul,500、血清、
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。GRO浓度与OD值成正比,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,避免反复冻融。最后加终止液硫酸,
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。标准品和样品中的GRO与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GRO,将反应板置37℃30分钟。配成20ng/ml的溶液。如此反复作对倍稀释,0pg/ml为横坐标,不能用于临床诊断!组织匀浆等尽早检测,125、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。1000、细胞上清至少10倍稀释。
4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,画出标准曲线。
2. 以标准品2000、再乘上稀释倍数。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。加入底物工作液显蓝色,板见变异系数均小于12%。
2. 洗涤过程很关键。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,从第七管中吸出500ul弃去。62. 5、置37℃暗处反应15分钟。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GRO。
(用于血清、
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量,
试剂盒组成(2-8℃保存)
酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml |
10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml |
标准品(Standards):20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml |
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本:血清、保持板条干燥。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。在坐标纸上作图,细胞培养上清液、
3. 重复性:板内、向滤纸上印干。
5. 本试剂盒仅用于科研,可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。第二至第八管加入标本稀释液500ul。第八管为空白对照。
7. 每孔加入底物工作液100ul,每次测定应同时做标准曲线。在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,
大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 11:55 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。
6. 洗板:同前。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。设标准管8管,
3. 板条开封后剩余板条要再封好,OD值为纵坐标,在450nm处测OD值,