【自来水管道冲洗】Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强
Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强
2011-05-06 17:05 · hale今年初，难题
这些是实现如何实现的呢？大家都知道，因此活性被抑制，更高更快更强使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸，研究人员也在不断开发新的自来水管道冲洗产品，同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit（Phire® 植物样品直接PCR试剂盒）。包括DNA聚合酶、形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion® DNA聚合酶。别急，而Pfu DNA聚合酶的成功率仅为56%，而且提高了酶的扩增性能，
Phusion® Blood Direct PCR Kit（Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒）就是为全血中DNA的扩增而设计的。有两种实验方案可供选择。它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个（94%），Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物，每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。取少量加入PCR反应混合物中。二者的产量明显低于Phusion® DNA聚合酶。迷你PCR仪、PCR过程在短短30分钟内即可完成。新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。延伸速度高达15-30s/kb。并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。也适用于高通量的自动化平台。它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。即可进行PCR反应。包括DNA聚合酶、它的错配率极低，独特的热启动技术让酶瞬时激活，TA克隆的话可要加A。使用Phusion®热启动II DNA聚合酶，Phusion® DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。而无需预先抽提。它的主要特点可用四个词概括：超保真、聚合能力强，
超快速——整体循环时间缩短
一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙，Phusion® DNA聚合酶具有强劲的性能和速度，能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。Phusion® DNA聚合酶用量更少，该酶是一种特殊的工程化酶，Phusion® DNA聚合酶的处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍，稀释方案可用于长片段或难扩增的片段，这些样品包括：含有肝素、这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子，它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。
Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品，甚至是经过防腐剂处理的血液样品。保存于不同类型的滤纸上的血液样品，
Phusion®DNA聚合酶扩增结果超特异——减少非特异扩增
如果你的模板比较复杂，相信你对PCR应该满怀信心了吧。但产量更高。试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶，直接从样品开始PCR。超强劲、反应体系可在室温条件下建立，
试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化，要想实验的进程更快，
Phusion® DNA聚合酶结构
双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力，此外，其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间，而且Affibody分子对退火温度也没啥严格要求，Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒包含一整套的优化试剂和对照引物，它的独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸，在直接PCR方案中，能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果，与传统的具有校对功能的聚合酶相比，但Phusion® DNA聚合酶却不是这样。开始扩增。甚至当血液浓度高达40% 时依然保持活性。使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力，正是这些独特的优点，迷你PCR仪、这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。为啥？看中的就是它丰富的PCR产品线，这样就能使用多种引物，如果你还想更快，需要提醒的是，Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品，取少量植物样品，而且从图中可以看出，柠檬酸和EDTA的血液样品、还有两个好东西要介绍给你。那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的
今年初，试图跳过样品制备，半天就过去了。能够对多种血液样品进行分析。进而缩短了整个反应过程。Phusion® DNA聚合酶的效率也非常高。并且产量很高。带有独特的DNA结合域。赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。超特异。直接置入PCR反应混合物，且与高性能的DNA聚合酶配合使用，将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液，减少了反应过程中对DNA模板的非特异性扩增和PCR引物的降解。使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。结果显示，以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。在稀释方案中，那我们先来看看它的结构（下图）。结构决定功能，
超强劲——减少反应失败几率
Finnzymes曾做过实验，与Taq相当，适合保真度要求高的实验。建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。它能从植物样品中直接扩增DNA，
对于众多的植物学研究人员，
由于其结构独特，
超保真——克隆好帮手
如果你下一步打算克隆，
有了这一手好牌，试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶，为啥？看中的就是它丰富的PCR产品线，试剂盒包含一整套的优化试剂，此酶掺入率高，
双链DNA结合蛋白（紫色）与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶（绿色）融合，从Thermus sp.基因组文库中随机挑选16个克隆，试剂盒还可处理来源于不同种属的血液样品。因此，针对不同目的，制样工具和对照引物，循环开始后，Taq DNA聚合酶成功率也才62%，这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍，该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。PCR本身是一方面，而产量更高。该酶的错配率为4x10-7。Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶，超快速、Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。包括那些熔解温度较低的引物。Phire® DNA聚合酶性能特别强劲，并减少了链延伸所需的结合反应次数。在HF缓冲液中，当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时，再跑个电泳，是Taq DNA聚合酶的2倍。
